Існує безліч укорінених міфів: «В Україні немає рідинної цитології», «Рідинна цитологія виконується повністю комп'ютером автоматично аж до видачі висновку, тобто комп'ютер сам «дивиться» мазки», «Метод рідинної цитології використовується на другому етапі обстеження» і т.і.
Безпосередньо препарати виготовляються на автоматичних установках (наприклад, BD SurePath TM Liquid-based Pap Test; BD PrepStain TM Slide Processor). Однак, готові цитологічні препарати дивляться живі люди - фахівці-цитологи.
У світі існують автоматичні установки, які проводять ранжування вже готових цитологічних препаратів з патологічними змінами і автоматичне виділення зон перегляду для подальшої оцінки цитологом. Такі установки використовуються у великих лабораторіях, куди надходять тисячі мазків популяційного скринінгу. Але у підсумку в будь-якому випадку висновок надає фахівець після перегляду скла під мікроскопом, а не комп'ютер.
Рис. 1 Цитологічний препарат, приготований за допомогою рідинного методу (зліва),
традиційний цитологічний мазок (праворуч).
традиційний цитологічний мазок (праворуч).
Я прийняла запрошення відвідати МЛ ДІЛА і переглянути весь процес приготування цитологічного препарату методом рідинної цитології за методикою BD SurePath TM Liquid-based Pap Test.
Для того, щоб отримати матеріал використовують спеціальні щіточки.
Матеріал разом з робочою частиною щіточки, яка знімається, поміщають у віалу - спеціальну ємність з фіксуючим розчином BD.
Рис. 2. Віала з фіксуючим розчином BD.
Подальший процес автоматизований, а значить приготування препарату стандартизовано і якість гарантована. Законсервований біоматеріал перемішують шляхом струшування і переносять на щільний реагент (PrepStain Density Reagent).
Рис. 3. Шейкер для перемішування клітинного матеріалу у віалах.
Проводиться рандомізація клітинного складу і перенесення матеріалу в пробірки. Далі переходимо до пристрою PrepMate, який призначений для перенесення клітинного розчину з віал до центрифужної пробірки з щільним реагентом.
Рис. 4. Установка PrepMate і автоматичний процес перенесення
клітинного матеріалу до центрифужної пробірки без відкриття віали.
клітинного матеріалу до центрифужної пробірки без відкриття віали.
На наступному етапі проводиться центрифугування (для приготування концентрованого клітинного осаду).
Рис. 5. Процес центрифугування контролюється автоматично.
Часткове видалення з матеріалу непотрібних для діагностики домішок крові, слизу і надлишкових клітин зони запалення проводять за допомогою аспіратора.
Рис. 6. Вакуумна аспірація (система відбору рідини) за допомогою модульного аспіратора Easy Aspirat.
Пробірки з клітинним розчином після аспірації домішок (в центрі).
Всі девайси, що використовуються мають одноразове застосування і автоматично скидаються після використання (праворуч).
Пробірки з клітинним розчином після аспірації домішок (в центрі).
Всі девайси, що використовуються мають одноразове застосування і автоматично скидаються після використання (праворуч).
Виконується виділення і очищення клітин шляхом запатентованого методу «стадії клітинного збагачення». Осаджені клітини знову суспендують, перемішують.
Рис. 7. Приготування збагаченого клітинного складу. Збагачений клітинний склад (фото в центрі).
Далі клітинний матеріал переносять в осадову камеру PrepStain Settling Chamber, встановлену на предметному склі PreCoat. В подальшому виконується ізоляція окремих клітин (монодісперсія) з наступним фарбуванням за модифікованою процедурою Папаніколау.
Рис. 8. Апарат BD PrepStain TM Slide Processor (зліва)
і вид осадової камери PrepStain Settling Chamber, встановленої на предметному склі (праворуч).
і вид осадової камери PrepStain Settling Chamber, встановленої на предметному склі (праворуч).
Приготування цитологічних препаратів, маркування, закріплення в штатив пристрою PrepStain, на якому відбувається перенесення клітинних зразків з центрифужної пробірки до осадової камери, поміщеної на предметне скло для мікроскопа.
Рис. 9. Автоматичне перенесення клітинних зразків з центрифужної пробірки на предметне скло (зліва)
і приготування, в т.ч. і автоматичне забарвлення препарату (праворуч) на BD PrepStain TM Slide Processor.
і приготування, в т.ч. і автоматичне забарвлення препарату (праворуч) на BD PrepStain TM Slide Processor.
Пристрій PrepStain автоматично забарвлює і промиває кожен препарат. Весь процес контролюється комп'ютерною програмою для кожного окремого скла, що повністю виключає можливість втручання ззовні.
Рис. 10. Процес приготування цитологічних препаратів
за методикою BD SurePath TM Liquid-based Pap Test контролюється комп'ютерною програмою.
за методикою BD SurePath TM Liquid-based Pap Test контролюється комп'ютерною програмою.
Рис. 11. Зовнішній вигляд цитологічних препаратів, приготованих
за рідинною методикою BD SurePath TM Liquid-based Pap Test (зліва) і вид препарату під мікроскопом (праворуч).
за рідинною методикою BD SurePath TM Liquid-based Pap Test (зліва) і вид препарату під мікроскопом (праворуч).
Дослідження препаратів проводиться лікарями-цитологами, які мають міжнародні сертифікати і підготовлені для оцінки цитологічних препаратів, приготованих методом рідинної цитології.
Рис.12. Лікарі-цитологи переглядають препарати під мікроскопом і видають висновки цитологічного дослідження.
Рис. 13. Представлений результат ко-тесту: Цитологічне дослідження методом рідинної цитології і ПЛР на ВПЛ.
Результат цитологічного дослідження в МЛ ДІЛА видається відповідно до класифікації Бетесда і класифікації ЦІН.
ВАЖЛИВО! З віал/контейнера додатково до ПАП-тесту методом рідинної цитології (технологією SurePath BD) можна провести дослідження на:
- вірус папіломи людини (ВПЛ), «Комплексне генотипування ДНК ВПЛ у напівкількісному форматі методом REAL TIME: 19 високоонкогенних 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 52, 56, 58, 59 26, 51, 53, 66, 68, 69, 73, 82 і 9 низькоонкогенних: 6, 11, 40, 42, 43, 44, 54, 61, 70»
- інфекції, що передаються статевим шляхом, «Скринінг 7 ІПСШ».
Автор тексту та фото Наталія Лігірда
