Cроки выполнения
Т-клетки – клетки, основной функцией которых является распознавание антигенов, формирование и регуляция эффекторного иммунного ответа и иммунологической памяти. Т-лимфоциты осуществляют реакции клеточного иммунитета: гиперчувствительности замедленного типа, реакции отторжения трансплантата, клеточно-опосредованной цитотоксичности. Примерно 81,4-98,4% Т-клеток представляют собой вариант альфа-бета-TcR и обозначаются как альфа-бета-Т-клетки. Остальные 1,6- 8,9% Т-клеток несут на своей поверхности гамма-дельта- TcR и обозначаются как гамма-дельта-Т-клетки. Aльфа-бета-Т-клетки подразделяются на две разные неперекрывающиеся субпопуляции. Клетки одной из них несут маркер CD4 и в основному “помогают ” в осуществлении иммунного ответа или “индуцируют” его, данная субпопуляция получила название Т-хелперы. Т-клетки другой субпопуляции несут маркер CD8 и обладают преимущественно цитотоксической активностью. Одной из особенностей гамма-дельта-Т-клеток в отличие от альфа-бета-Т-клеток является то, что они распознают непептидные антигены, полученные из микробных патогенов, независимо от МНС. Наряду с NK-клетками гамма-дельта-Т-клетки относят к врожденному иммунитету. Их основная функция защита «входных ворот» - кишечника, дыхательных путей. Значительное повышение наблюдается при бактериальных инфекциях и при паразитарных инвазиях, а также при таких заболеваниях как туберкулез, цитомегаловирус, туляремия. Поэтому, для более полной характеристики Т-клеток пациента анализ следует проводить не только по такому линейно-специфическому маркеру, как CD3, но и по наличию субпопуляций альфа-бета-Т-клеток и гамма-дельта-Т-клеток. Важность определения последних становится очевидной для ряда заболеваний. В первую очередь к ним относится ВИЧ-инфекция, вторичные и первичные иммунодефицитные состояния, сопровождающие длительной персистенцией микроорганизмов в организме человека на фоне депрессии Т-клеточного звена иммунной системы. Особенно важным становится определение гамма-дельта-Т-клеток при оценке общего количества Т-клеток в тех случаях, когда от их количества зависит доза назначаемых препаратов (например, назначение антиретровирусной терапии ВИЧ- инфицированным пациентам).
Количественный анализ Т-клеток необходим для иммунологического контроля состояний приобретенного иммунодефицита (СПИД), мониторинга за пациентами после трансплантации костного мозга, и эффективности иммунодепрессивной терапии.
Обнаружение увеличенной циркулирующей субпопуляции гаммадельта-Т-клеток может позволить сделать предположение о недавней или продолжающейся хронической стимуляции, особенно на слизистых оболочках или участках кожи.
Эта информация позволяет клиницистам сделать предположение о возможном медленно прогрессирующем инфекционном заболевании.
Маркер нарушений Т-клеточного звена иммунитета
Минорная субпопуляция Т-клеточного звена - гаммадельта–Т-клетки оказались весьма информативными в диагностике различных иммунопаталогий.
Содержание гаммадельта-Т-клеток в периферической крови варьирует, существуют половые и возрастные различия.
Их количество увеличивается с момента рождения до наступления полового созревания, а в дальнейшем постепенно снижается. У женщин количество гаммадельта-Т-клеток несколько выше, и этот уровень сохраняется значительно дольше, чем у мужчин.
Несмотря на свою "минорность" данная субпопуляция выполняет целый ряд важных функций, так они могут усиливать иммунный ответ, производя большие количества интерферона-гамма (IFN-гамма), фактора некроза опухолей-альфа (TNF-альфа) и хемокины.
Кроме этого, гаммадельта–Т-клетки имеют эффекторную (цитотоксическую) активность. Роль гаммадельта-Т-клеток весьма существенна в устойчивости организма против целого ряда микроорганизмов. Так функциональную значимость гаммадельта-Т-клеток отмечали в устойчивости к Mycobacterium, Borellia, Francisellatularensis, Salmonella и вирусов, включая вирус ВИЧ.
Кроме того, гаммадельта-Т-клетки играют существенную роль и в противоопухолевом ответе, в частности было описано значительное увеличение этих клеток у пациентов с лимфомой. С другой стороны, гаммадельта–Т-клетки могут быть вовлечены в патогенез заболеваний с гиперактивацией иммунной системы, например, сахарного диабета, болезни Бехчета, а также бронхиальной астмы.
Лимфоциты (CD45++CD14-)
Метод: Проточна цитофлюориметрія
Диапазон измерений: не применяется
Единица измерения: x10*9/л
Референтные значения:
| Возраст | М | Ж | Комментарии |
|---|---|---|---|
| 0 - 1Л | 3.5 - 11.3 | 3.5 - 11.3 | |
| 1Л - 2Л | 2.7 - 11.9 | 2.7 - 11.9 | |
| 2Л - 6Л | 1.7 - 6.9 | 1.7 - 6.9 | |
| 6Л - 10Л | 1.1 - 5.9 | 1.1 - 5.9 | |
| 10Л - 16Л | 1.0 - 5.3 | 1.0 - 5.3 | |
| 16Л - 120Л | 1.0 - 2.8 | 1.0 - 2.8 |
yd-Т-клетки (CD45+CD3+TcRab-TcRyd+)
Метод: Проточна цитофлюориметрія
Диапазон измерений: до 100
Единица измерения: %
Референтные значения:
| Возраст | М | Ж | Комментарии |
|---|---|---|---|
| 0 - 120Л | 1.5 - 9.0 | 1.5 - 9.0 |
Лимфоциты (CD45++CD14-) %
Метод: Иммунотурбидиметрический
Диапазон измерений: до 100
Единица измерения: %
Референтные значения:
| Возраст | М | Ж | Комментарии |
|---|---|---|---|
| 0 - 1Л | 22 - 70 | 22 - 70 | |
| 1Л - 2Л | 37 - 60 | 37 - 60 | |
| 2Л - 6Л | 30 - 55 | 30 - 55 | |
| 6Л - 10Л | 30 - 50 | 30 - 50 | |
| 10Л - 16Л | 30 - 46 | 30 - 46 | |
| 16Л - 120Л | 19 - 37 | 19 - 37 |
Общие Т-лимфоциты (CD45+CD3+)
Метод: Проточна цитофлюориметрія
Диапазон измерений: не применяется
Единица измерения: x10*9/л
Референтные значения:
| Возраст | М | Ж | Комментарии |
|---|---|---|---|
| 0 - 3М | 2.0 - 6.5 | 2.0 - 6.5 | |
| 3М - 1Л | 1.8 - 6.5 | 1.8 - 6.5 | |
| 1Л - 3Л | 1.5 - 5.4 | 1.5 - 5.4 | |
| 3Л - 6Л | 1.4 - 3.8 | 1.4 - 3.8 | |
| 6Л - 16Л | 1.1 - 2.6 | 1.1 - 2.6 | |
| 16Л - 120Л | 0.8 - 2.2 | 0.8 - 2.2 |
Общие Т-лимфоциты (CD45+CD3+) %
Метод: Проточна цитофлюориметрія
Диапазон измерений: до 100
Единица измерения: %
Референтные значения:
| Возраст | М | Ж | Комментарии |
|---|---|---|---|
| 0 - 3М | 55 - 80 | 55 - 80 | |
| 3М - 1Л | 50 - 76 | 50 - 76 | |
| 1Л - 3Л | 54 - 80 | 54 - 80 | |
| 3Л - 6Л | 59 - 78 | 59 - 78 | |
| 6Л - 16Л | 59 - 76 | 59 - 76 | |
| 16Л - 120Л | 60 - 80 | 60 - 80 |
ab-Т-клетки (CD45+CD3+TcRab+TcRyd-)
Метод: Проточна цитофлюориметрія
Диапазон измерений: до 100
Единица измерения: %
Референтные значения:
| Возраст | М | Ж | Комментарии |
|---|---|---|---|
| 0 - 120Л | 87 - 98 | 87 - 98 |
венозная кровь
За 8 часов Выдержать голодание, исключить жирную пищу. Можно пить воду. За 2 часа допускается легкий прием нежирной пищи: детям до 5 лет и взрослым с противопоказаниями по голоданию. Непосредственно перед обследованием не курить. исключить физические нагрузки и стрессы. Согласовать с врачом применение глюкокортикоидных гормонов, цитостатических, иммуносупрессирующих и иммуностимулирующих препаратов (амиксин, тилорон и др.).
венозная кровь
Биоматериал для исследования:
венозная кровь.
Тип пробирки, объем БМ в пробирке:
Вакутейнер с натрий-гепарином, 4,0 мл.
Условия доставки:
Температура от 18 до 25 градусов,
24 ч.
- Повышение относительного уровня гаммадельта-T-клеток характерно при:
• ВИЧ, цитомегаловирусе.
• Вирус Эпштейн-Бара.
• Туберкулезе легких.
• Легионеллезе, Туляримии.
• Сальмонеллез.
• Боррелиозе (болезнь Лайма).
• Атопическом дерматите (у детей).
• Болезни Крона.
• Болезни Бехчета.
• Первичных иммунодефицитах. - Снижение относительного уровня гаммадельта-T-клеток характерно при:
• Атопическом дерматите (у взрослых).
• Возможно возрастное снижение относительного уровня гаммадельта-T-клеток.