Cроки выполнения
NK-клетки представляют собой особою популяцию больших гранулярных лимфоцитов, способных лизировать клетки-мишени, инфицированные вирусами и другими внутриклеточными антигенами, мутировавшие опухолевые клетки, а также другие клетки аллогенного и ксеногенного происхождения. Литическая активность NK-клеток проявляется при первичном контакте без предварительной сенсибилизации, в отличие от Т-клеток. Популяция NK-клеток обладает достаточной гетерогенностью по своему составу. Выделяют несколько их субтипов, а именно пре-NK-клетки, зрелые NK-клетки и активированные NK-клетки. Данная особенность связана с различной экспрессией маркеров клеточной поверхности. Субпопуляция CD16 CD56 составляет приблизительно 80-90% от NK-клеток периферической крови, они слабо секретируют цитокины, но обладают высокой цитолитической активностью. Субпопуляция CD3-CD16 CD56 составляет приблизительно 10-20% от общего количества NK-клеток. В ответ на стимуляцию IL-2 данная популяция клеток способна секретировать IFN-гамма, TNF-бета, IL-10, IL-13 и обладает меньшей цитолитической активностью.
• Диагностика различных патологических состояний, связанных с нарушение NK-клеточного звена иммунитета. • Оценка эффективности коррекции нарушений иммунитета.
Маркер нарушений NK-клеточного звена иммунитета
Принято считать, что выраженность лизиса отражает способность NK-клеток обеспечивать эффекторную реакию (цитолиз) естественных клеток-мишеней – клеток, инфицированных вирусами, трансформированных или подвергшихся различным стрессорным воздействиям.
Активность NK-клеток может ослабляться с возрастом, а также при различных заболеваниях.
При развитии опухолей активность NK-клеток вначале возрастает, затем ослабляется. NK-клетки также могут быть причастны к развитию иммунопатологии.
NK-клетки цитокинпродуцирующие (CD45+CD3-CD16dim-to-negCD56bright)
Метод: Проточна цитофлюориметрія
Диапазон измерений: до 100
Единица измерения: %
Референтные значения:
| Возраст | М | Ж | Комментарии |
|---|---|---|---|
| 0 - 120Л | 2 - 7 | 2 - 7 |
Общие NK-клетки (LGL) (CD45+CD3-CD16+56+) %
Метод: Проточна цитофлюориметрія
Диапазон измерений: до 100
Единица измерения: %
Референтные значения:
| Возраст | М | Ж | Комментарии |
|---|---|---|---|
| 0 - 3М | 2 - 14 | 2 - 14 | |
| 3М - 1Л | 4 - 16 | 4 - 16 | |
| 1Л - 3Л | 5 - 18 | 5 - 18 | |
| 3Л - 6Л | 6 - 20 | 6 - 20 | |
| 6Л - 16Л | 6 - 20 | 6 - 20 | |
| 16Л - 120Л | 6 - 20 | 6 - 20 |
Общие NK-клетки (LGL) (CD45+CD3-CD16+56+)
Метод: Проточна цитофлюориметрія
Диапазон измерений: не применяется
Единица измерения: x10*9/л
Референтные значения:
| Возраст | М | Ж | Комментарии |
|---|---|---|---|
| 0 - 3М | 0.05 - 0.7 | 0.05 - 0.7 | |
| 3М - 1Л | 0.1 - 0.9 | 0.1 - 0.9 | |
| 1Л - 3Л | 0.07 - 1.3 | 0.07 - 1.3 | |
| 3Л - 6Л | 0.1 - 0.9 | 0.1 - 0.9 | |
| 6Л - 16Л | 0.1 - 0.8 | 0.1 - 0.8 | |
| 16Л - 120Л | 0.1 - 0.4 | 0.1 - 0.4 |
Лимфоциты (CD45++CD14-)
Метод: Проточна цитофлюориметрія
Диапазон измерений: не применяется
Единица измерения: x10*9/л
Референтные значения:
| Возраст | М | Ж | Комментарии |
|---|---|---|---|
| 0 - 1Л | 3.5 - 11.3 | 3.5 - 11.3 | |
| 1Л - 2Л | 2.7 - 11.9 | 2.7 - 11.9 | |
| 2Л - 6Л | 1.7 - 6.9 | 1.7 - 6.9 | |
| 6Л - 10Л | 1.1 - 5.9 | 1.1 - 5.9 | |
| 10Л - 16Л | 1.0 - 5.3 | 1.0 - 5.3 | |
| 16Л - 120Л | 1.0 - 2.8 | 1.0 - 2.8 |
NK-клетки цитолитические (CD45+CD3-CD16brightCD56dim)
Метод: Проточна цитофлюориметрія
Диапазон измерений: до 100
Единица измерения: %
Референтные значения:
| Возраст | М | Ж | Комментарии |
|---|---|---|---|
| 0 - 120Л | 93 - 98 | 93 - 98 |
Лимфоциты (CD45++CD14-) %
Метод: Иммунотурбидиметрический
Диапазон измерений: до 100
Единица измерения: %
Референтные значения:
| Возраст | М | Ж | Комментарии |
|---|---|---|---|
| 0 - 1Л | 22 - 70 | 22 - 70 | |
| 1Л - 2Л | 37 - 60 | 37 - 60 | |
| 2Л - 6Л | 30 - 55 | 30 - 55 | |
| 6Л - 10Л | 30 - 50 | 30 - 50 | |
| 10Л - 16Л | 30 - 46 | 30 - 46 | |
| 16Л - 120Л | 19 - 37 | 19 - 37 |
NK-клетки активированные (CD45+CD3-CD16+CD56+CD38+CD8dim)
Метод: Проточна цитофлюориметрія
Диапазон измерений: до 100
Единица измерения: %
Референтные значения:
| Возраст | М | Ж | Комментарии |
|---|---|---|---|
| 0 - 120Л | 17 - 40 | 17 - 40 |
венозная кровь
За 8 часов Выдержать голодание, исключить жирную пищу. Можно пить воду. За 2 часа допускается легкий прием нежирной пищи: детям до 5 лет и взрослым с противопоказаниями по голоданию. Непосредственно перед обследованием не курить. исключить физические нагрузки и стрессы. Согласовать с врачом применение глюкокортикоидных гормонов, цитостатических, иммуносупрессирующих и иммуностимулирующих препаратов (амиксин, тилорон и др.).
венозная кровь
Биоматериал для исследования:
венозная кровь.
Тип пробирки, объем БМ в пробирке:
Вакутейнер с натрий-гепарином, 4,0 мл.
Условия доставки:
Температура от 18 до 25 градусов,
24 ч.
- Высокая активность и количество NK-клеток характерно при следующих паталогических состояниях (в скобках указаны ассоциированные симптомы и риски):
• Хроническая пролиферация больших гранулярных лимфоцитов - LGL- пролиферация (LGL-лимфоцитоз, цитопения, спленомегалия).
• Острая пролиферация больших гранулярных лимфоцитов -LGL- пролиферация (встречается совместно с активной лейкемией/лимфомой).
Многие акушеры и гинекологи часто используют показатели NK-клеточного звена, особенно их активность, в качестве прогностического маркера благоприятности течения беременности, успешности ЭКО, угрозы СА, фактора бесплодия.
Однако, несмотря на огромное количествово полученных научных и клинических данных, вопрос прямого влияния периферических NK-клеток на течение беременности остается спорным.
Для пренатальной диагностики обязятельно необходимо комплексное иммунологическое обследование, мониторинг в динамике с обязательной "точкой отсчета" исходного обследования в здоровом состоянии до лечения/ЭКО. - Снижение уровня NK клеток может быть свидетельством врождённого нарушения иммунитета (первичного иммунодефицита - чаще всего, это комбинированый иммунодефицит) или быть следствием иммуносупрессивной терапии